該技術(shù)的實(shí)驗(yàn)原理是將標(biāo)記有熒光素的Taqman探針，或者在反應(yīng)體系中加入過量的SYBR染料非特異性與模板DNA混合后，在一系列溫度的變化作用下，熒光素游離于反應(yīng)體系中，在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光，隨著循環(huán)次數(shù)的增加，被擴(kuò)增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長，通過實(shí)時(shí)檢測與之對應(yīng)的隨擴(kuò)增而檢測熒光信號強(qiáng)度，求得Ct值（即每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號到達(dá)設(shè)定閾值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)），同時(shí)利用數(shù)個(gè)已知模板濃度的標(biāo)準(zhǔn)品或內(nèi)參作對照，即可得出待測標(biāo)本目的基因的拷貝數(shù)。熒光定量PCR的優(yōu)點(diǎn)在于其簡便操作、特異性以及對樣本中目的基因進(jìn)行定量，在分子生物學(xué)基礎(chǔ)研究中廣泛應(yīng)用。